咽拭子采样作为呼吸道传染病诊断的重要技术手段，其操作质量直接影响检测结果的准确性。本文系统梳理了咽拭子采样的标准操作流程、关键技术环节、注意事项及后续处理要求，旨在为医护人员提供全面专业的技术指导。从采样前的准备工作到采样过程中的操作细节，再到采样后的标本处理，每个环节都有其科学依据和规范要求。掌握这些要点不仅能提高采样质量，减少假阴性结果，还能提升受检者舒适度，为疾病诊断和公共卫生防控提供可靠的技术保障。

采样前的准备工作

规范严谨的准备工作是确保咽拭子采样质量的基础环节，这一阶段的工作直接影响后续采样操作的顺利进行。采样前的准备不仅包括对受检者的必要告知和准备，还涉及采样环境、物资和人员的标准化准备，这些要素共同构成了高质量采样的前提条件。

受检者需在采样前半小时严格遵守禁食水规定，避免进食、饮水、吸烟、咀嚼口香糖等活动。这一要求的科学依据在于防止食物残渣或液体干扰采样区域，确保能够有效采集到咽喉部位的黏膜细胞和可能存在的病原体。进食或饮水可能导致咽喉部机械冲刷效应，减少黏膜表面病原体载量；吸烟可能改变局部微环境，抑制病原体活性；咀嚼口香糖则可能将口腔内食物残渣或化学物质带入采样区域，这些因素都可能影响检测结果的准确性。对于儿童等特殊群体，医护人员需要以更通俗易懂的方式传达这些要求，并确保其得到严格执行。

采样环境的准备同样至关重要。理想的采样场所应具备良好的通风条件，面积不小于3平方米，并划分明确的清洁区与污染区。采样台面应配备紫外线灯等消毒设备，在采样间隙进行定期消毒。采样人员进入工作区域前需严格按照标准进行个人防护，佩戴医用防护口罩、护目镜或面屏、一次性工作帽、隔离衣和手套。防护装备的穿戴顺序和严密性检查不可忽视，特别是要确保口罩的气密性和手套的完整性，这是防止操作者感染的基本保障。

采样物资的准备需要全面且细致。需准备的物品包括：无菌咽拭子（可以是带有折断线的专用拭子）、病毒保存液（含胍盐或表面活性剂等灭活成分）、标本袋、生物安全运输箱、手消毒剂、医疗废物垃圾桶等。每件物品都应检查有效期和包装完整性，特别是病毒保存液的性状和量是否正常（通常为2-3ml）。采样管应选择带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的专用容器，容器外需留有清晰标记样本信息的位置。对于大规模筛查，可选用具有病毒灭活功能的采样管，如含异硫氰酸胍或盐酸胍等成分的保存液，以降低运输和检测过程中的生物安全风险。

信息核对与记录是采样前不可忽视的环节。采样人员需仔细核对受检者的身份信息，包括姓名、身份证号、联系方式等，并确保标本编号的唯一性和可追溯性。在信息化管理系统完善的机构，可采用条形码或二维码系统进行样本标识；在条件有限的场所，至少应使用防水记号笔在采样管上清晰标注基本信息。这些信息管理措施看似与采样技术无关，实则对后续的检测结果报告和流行病学调查至关重要，可有效避免样本混淆和结果误报。

心理准备与沟通在采样前同样重要。医护人员应向受检者简要说明采样流程和可能的不适感，特别对儿童、老人等特殊群体应给予更多心理支持。有效的沟通能够减轻受检者的焦虑情绪，提高配合度，从而获得更高质量的样本。对于咽反射敏感的人群，可建议其在采样前进行深呼吸练习，或在采样时通过发"啊"音来减轻不适。这些细节上的关怀不仅能提升采样效率，也能改善受检者的体验。

标准采样操作步骤

规范化的采样操作是确保咽拭子样本质量的核心环节，每个技术动作都有其明确的医学依据和标准要求。医护人员需通过系统培训和反复练习来掌握这些关键技术，将标准操作流程内化为精确的肌肉记忆，从而在各种工作环境下都能采集到符合检测要求的样本。

采样操作的首步是核对受检者信息并确认其已完成采样前准备。操作者需快速消毒双手，取出专用咽拭子，同时指导受检者摘下口罩，采取正确的体位——头部后仰约45度，嘴张大并发出持续的"啊"音，这一姿势有助于充分暴露咽后壁和扁桃体区域。对于儿童等配合度可能欠佳的受检者，可考虑使用压舌板辅助暴露视野，但需注意动作轻柔，避免引发呕吐反射。操作者应借助良好的照明条件（如头灯或手电筒）观察受检者的咽喉部解剖结构，特别留意扁桃体、咽后壁等关键采样区域是否有炎症、分泌物等异常情况，这些观察信息对后续的临床判断可能有重要参考价值。

拭子插入与擦拭技术是采样过程中具技术含量的环节。操作者应以执笔式握住拭子柄，将拭子头快速而平稳地越过舌根，避免触碰舌面和颊黏膜等非目标区域。抵达目标区域后，先在左侧扁桃体隐窝处适度用力（约500-1000g压力）来回擦拭3-5次，然后在右侧扁桃体重复相同操作，在咽后壁上下擦拭3-5次。这里的"适度用力"十分关键：力度过小可能导致细胞采集量不足，影响检测灵敏度；力度过大则可能引起黏膜损伤出血，既增加受检者不适，又可能因血液中的抑制物干扰后续PCR反应。实际操作中，当看到拭子头明显弯曲变形时，通常表明已达到适当的压力水平。

采样时间的控制同样影响样本质量。在每个采样区域（双侧扁桃体和咽后壁）的擦拭时间应控制在1-2秒，总采样时间以15-30秒为宜。这段时间足以使拭子纤维与黏膜分泌物充分接触，吸附足够数量的上皮细胞和病原体。操作者需注意，在采样过程中应保持拭子的旋转动作，通过轻柔的旋转（通常为360°）使拭子头的所有表面都能接触到黏膜组织，提高细胞捕获效率。这种旋转不是简单的机械转动，而是配合轻微提拉的动作，有助于拭子纤维深入隐窝结构，采集到更多深层细胞。

采样完成后的拭子取出与保存步骤同样需要规范操作。取出拭子时应沿插入路径快速退出，特别注意避免触碰舌部和牙齿，以防污染。将采集到样本的拭子头立即浸入装有2-3ml病毒保存液的采样管中，在拭子柄的预设折断处将其折断，确保拭子头完全浸没在液体中，然后旋紧管盖。这一系列动作应一气呵成，尽量减少拭子在空气中的暴露时间，防止样本干燥或交叉污染。对于使用含胍盐等灭活剂的保存液，应确认拭子头在液体中充分震荡混匀，使病原体迅速灭活，提高运输和检测过程的安全性。

采样过程中的沟通与观察是高质量操作的重要组成部分。操作者在采样全程应保持与受检者的言语交流，指导其维持正确体位和呼吸节奏，对可能出现的不适反应提前预警。当受检者出现明显咽反射时，可适当暂停操作，待其放松后继续完成采样。同时密切观察受检者面色、呼吸等生命体征，特别是对老年人和儿童，要警惕过度刺激迷走神经导致的心率下降等反应。采样完成后，应迅速告知受检者可重新佩戴口罩，并指引其按指定路线离开采样区，避免与待检人员近距离接触。

特殊人群的采样技巧

差异化采样策略对于特殊人群的咽拭子采集至关重要，根据不同群体的生理和心理特点调整操作方法，能够在保证采样质量的同时很大限度降低不适感和并发症风险。医护人员需掌握这些针对性技巧，才能应对实际工作中复杂多样的人群需求。

儿童群体的咽拭子采样面临配合度低、咽喉结构细小、咽反射敏感等多重挑战。对于婴幼儿，建议采用"先鼻咽后口咽"的采样顺序，即先采集鼻咽拭子，再采集咽拭子，这种顺序可降低因咽部刺激引发呕吐的风险。采样时可让儿童坐在家长腿上，家长一手固定儿童头部，另一手轻轻握住儿童双手，操作者则使用压舌板轻轻下压舌前2/3处，暴露咽喉后进行快速采样。对于3岁以上的儿童，采样前的沟通解释尤为重要，可使用玩偶示范或奖励承诺等方式减轻恐惧感。技术操作上，儿童咽拭子的插入深度应适当减少，擦拭力度较成人更轻，但擦拭次数可增加至5-7次以弥补单次采集量的不足。特别注意在冬季采样时，应将拭子放在手心预温至接近体温，避免冷刺激加重儿童的不适反应。

老年人群的采样需要关注其可能的生理功能衰退和基础疾病。许多老年人存在颈椎活动受限，难以达到标准头后仰角度，此时可在其肩下垫小枕头辅助体位摆放。对于患有帕金森病等神经系统疾病的老年人，采样时机选择在其药物疗效出色状态时进行，必要时由两名工作人员协作完成采样。老年人口咽部黏膜通常较薄脆，血管丰富，擦拭力度应比标准操作减轻约30%，并密切观察有无出血倾向。有吞咽功能障碍的老年人采样时需特别注意防止误吸，采样后至少观察30秒确认无呛咳反应。对于戴假牙的老年人，可建议其在采样前取下假牙，既能更好暴露咽喉，也避免假牙脱落造成意外。

咽反射极度敏感人群在采样时常出现强烈呕吐反应，对这类受检者可采取多种措施提高采样成功率。在采样时间上，选择其空腹时段（如清晨）进行可减少呕吐物量；采样前1小时可建议其少量含服碎冰块或冰水，通过冷刺激暂时降低咽部敏感度。体位方面，让受检者头部前倾而非后仰，使唾液自然聚积于口腔前部而非咽喉处，可减轻呕吐冲动。操作技术上采用"快速单次擦拭法"：预先将拭子塑形成适当弧度，一次快速插入后在中线位置（避开两侧易触发反射的区域）单次强力擦拭后立即退出。对于反复尝试仍无法耐受口咽拭子的敏感者，可考虑改用鼻咽拭子作为替代采样方式。

精神行为异常或认知障碍人群的采样需要更多耐心和技巧。对轻度焦虑或恐惧者，采样前详细解释每个步骤的目的和感受，给予充分的选择权和掌控感，可有效降低其抗拒行为。对自闭症谱系障碍患者，尽量保持环境安静，避免不必要的感官刺激，操作者动作应平稳可预测。对严重精神症状或躁动不安者，必要时在专业医护人员评估后采用适当的镇静或约束措施，但需严格掌握适应证并确保有监护抢救条件。无论哪种情况，都应尊重受检者的人格尊严，避免强制性操作除非在极端紧急情况下。

免疫功能低下人群包括肿瘤化疗患者、HIV感染者、器官移植后服用免疫抑制剂者等，其采样需特别注意院内感染防控。这类人群的采样应安排在独立空间或人流量较少的时段进行，采样人员需升级防护措施（如佩戴N95口罩和面屏）。采样后对受检者的健康监测也很重要，因其黏膜屏障功能可能受损，采样操作带来的微小损伤理论上可能增加局部感染风险。对造血干细胞移植后等极度免疫抑制状态者，采样前可考虑预防性使用无菌生理盐水漱口，减少口腔定植菌对采样部位的污染。

肥胖或解剖结构异常人群的采样需要调整常规技术。严重肥胖者常伴有舌体肥大和咽喉狭窄，标准长度的拭子可能无法到达咽后壁，此时可选用加长型拭子或在无菌条件下将两支拭子头尾相接使用。对既往有咽喉手术史者，采样前应详细了解手术方式和范围，避开瘢痕和成形区域，选择有黏膜皱襞的相对正常部位采样。睡眠呼吸暂停综合征患者多伴有咽腔狭小和黏膜松弛，采样力度需格外轻柔，避免加重黏膜水肿。

采样后的规范处理

严谨的采样后处理流程是确保样本检测准确性的延续保障，这一阶段的工作虽然不直接面对受检者，但对检测结果的可靠性起着决定性作用。从样本标记、保存到运输、交接，每个环节都需要严格执行标准操作规程，构建完整的样本质量保障链条。

样本标记与登记是采样后首要工作。操作者在完成采样后应立即在采样管上标注受检者信息，至少包括姓名（或编号）、采样日期和时间。标记位置应选择管身而非管盖，使用防水油性笔书写，避免因冷凝水或酒精擦拭造成信息模糊。同时需在登记表或电子系统中详细记录样本信息，包括标本编号、采集部位、类型、数量等关键数据。在采用混采策略时（如10合1或5合1混采），要特别注意做好组内成员信息的准确关联，并在采样管上明确标注混采比例。任何信息记录都应遵循"双人核对"原则，即由两名工作人员分别核对并签字确认，很大限度降低人为错误风险。

样本包装与保存条件直接影响病原体核酸的稳定性。将密闭后的标本装入专用密封袋，每袋限装一份标本，密封前确保采样管盖已旋紧无渗漏。密封袋应选用生物安全专用材质，具有双层密封条和生物危害标识。根据检测项目的不同要求，样本可能需要不同的保存条件：用于病毒分离和核酸检测的标本如在24小时内检测，可置于4℃保存；如超过24小时则需置于-70℃或以下保存（若无-70℃条件可暂存于-20℃冰箱，但不宜超过72小时）。保存设备应有温度连续监测和报警装置，并预留应急电源，确保在任何情况下都能维持稳定的保存环境。特别需要注意的是，含胍盐等灭活剂的保存液样本也需低温保存，灭活并不能完全替代冷链要求。

样本运输管理是连接采样和检测的关键环节。院内运输应使用专用样本转运箱，由经过培训的专人按固定路线定时运送，避免样本在科室间长时间滞留。院际或长途运输需符合《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》，使用三重包装系统（内层为密封样本管，中层为吸水材料，外层为坚固隔热运输箱），并配备足够的干冰或其他制冷剂保持低温状态。运输箱外需明显标注"高致病性病原微生物"警示标识和联系人信息，运输人员需随身携带样本清单和运输许可证复印件。无论何种运输方式，都应建立完整的交接记录，包括交接时间、样本数量、保存状态和双方签字，确保样本流转全程可追溯。

质量控制记录是评估采样后处理效果的重要依据。每天应记录采样管使用数量与剩余数量，核对无误；定期检查保存冰箱的温度记录，确认无异常波动；对运输过程中的温度变化进行监测和存档。这些质量记录不仅能及时发现处理过程中的问题，也为可能出现的检测结果争议提供追溯依据。实验室在接收样本时应进行严格的质量检查，包括核对样本信息、检查采样管密闭性、评估保存液性状等，对不合格样本（如泄漏、干涸、标记不清等）应详细记录并立即通知采样部门重新采集。

生物安全与废弃物处理是采样后不可忽视的环节。使用过的防护装备应按感染性医疗废物处理，装入双层黄色医疗废物袋，鹅颈式封口并标注"新型冠状病毒"标识。采样工作台面在每例采样后都应用75%酒精或含氯消毒剂擦拭消毒，空气可通过紫外线照射或空气消毒机净化。操作者在脱卸防护装备时应特别注意避免外层污染面接触皮肤和衣物，每步骤后都进行手卫生。大规模采样产生的医疗废物需专人专车收集转运，确保日产日清，并做好交接记录以备监管部门检查。

数据管理与隐私保护贯穿采样后处理的各个环节。所有样本信息都应视为敏感医疗数据，严格限制接触人员范围，电子数据系统应设置分级访问权限。样本编号与受检者身份信息的关联表需加密存储，仅在必要时授权解密。检测结果的报告和传递应通过安全渠道进行，避免通过普通邮件或社交软件发送未加密的检测报告。在科研或公共卫生用途中使用样本数据时，应进行去标识化处理，确保无法追溯到具体个人。这些措施不仅是法规要求，也是建立公众信任的基础，有助于提高传染病防控措施的依从性。

应急处理预案对采样后可能出现的意外情况至关重要。应预先制定样本泄漏、保存设备故障、运输延误等各种情况的处理流程，并配备相应的应急物资。如发生样本管破裂或泄漏，应立即用吸水材料覆盖，小心倒入含氯消毒剂浸泡30分钟后再清理；保存冰箱出现故障时，应迅速将样本转移至备用设备并评估样本质量；运输延误导致干冰耗尽时，应及时联系接收实验室评估是否继续检测或重新采样。定期组织相关人员进行应急演练，确保每个人都熟悉处置流程和自身职责，很大限度降低意外事件对样本质量和检测结果的影响。

常见问题与质量控制

质量监控体系的建立与完善是保障咽拭子采样持续改进的关键环节。通过系统性地识别常见问题、分析根本原因并实施针对性改进措施，可显著提高采样操作的成功率和样本合格率，为疾病诊断和公共卫生决策提供更可靠的数据支持。

采样深度不足是常见的操作问题之一。部分操作者因担心引起受检者不适或呕吐反应，倾向于浅表采样，仅擦拭口腔前部或舌根区域，未能有效到达咽后壁和扁桃体等目标部位。流行病学研究显示，采样深度不足可导致假阴性率升高30%-50%，严重影响检测的临床价值。解决这一问题的技术要点包括：选用长度适中的拭子（成人通常15-20cm）；操作前通过观察确定个体化的插入路径；对咽反射敏感者采用分步插入法（先抵住舌根，待适应后再继续深入）。质量监控人员可通过定期检查采样后的拭子头形态（应有明显黏液附着）和抽查操作视频来评估采样深度是否达标。

采样力度不当同样影响样本质量。力度过小会导致上皮细胞采集量不足，病原体载量低于检测限；力度过大则可能造成黏膜损伤出血，血液中的PCR抑制物干扰检测反应。实际操作中，合适的力度应使拭子头明显弯曲但不会造成受检者明显疼痛或出血。培训新操作者时，可使用力度反馈模拟器进行练习，培养手部力度感觉；也可在监督下对志愿者进行采样，通过即时PCR检测结果反馈来调整力度参数。质量控制记录中应包含受检者不适反应和出血情况的统计，作为评估操作力度的重要参考。

采样顺序错误是容易被忽视的质量问题。标准流程要求在双侧扁桃体和咽后壁三个区域进行系统采样，但实际操作中可能因受检者反应或操作者习惯而遗漏某些区域。研究表明，不同采样区域的病原体检出率存在差异，系统性的多区域采样可提高总体检出率15%-20%。质量控制措施包括：制定明确的采样路线图（如"左扁桃体→右扁桃体→咽后壁"顺序）；在培训中使用染色示踪技术检查采样区域覆盖率；定期审核操作者的采样流程一致性。对于经验不足的操作者，可提供带有解剖图示的操作指引，帮助其建立清晰的空间定位。

样本保存不当是影响检测结果的非技术因素。常见问题包括：拭子在空气中暴露时间过长导致干燥；保存液量不足或过多；采样管密封不严造成泄漏；保存温度不符合要求等。这些因素可能导致核酸降解或微生物失活，即使采样操作本身正确也难以获得准确结果。质量控制要点包括：定期检查保存液性状（颜色、澄清度、pH值）；监测冰箱温度并记录波动情况；对运输过程中的温度变化进行全程监控；实验室接收样本时进行外观检查和数量核对。可考虑在采样点配备小型离心机，对样本进行初步离心观察沉淀量，快速评估采样质量。

交叉污染风险在批量采样时尤为突出。操作者在连续采样过程中可能通过手套、工作台面或空气介质造成样本间的交叉污染。质量控制措施应包括：严格执行"一采一手消"制度（每例采样后更换手套或进行手消毒）；采样台面每例采样后使用消毒剂擦拭；合理安排采样间距（通常不少于1米）；采用独立包装的单支拭子和预装保存液的采样管。在条件允许时，可定期对环境表面和操作者手套进行PCR检测，监控潜在的污染风险。空气流向管理也很重要，采样区应保持负压或良好通风，避免气溶胶在局部积聚。

信息管理错误虽不直接影响样本质量，但可能导致严重的后续问题。常见错误包括：样本标识不清或脱落；登记信息与实物不符；电子系统录入错误等。这些错误可能造成检测结果张冠李戴，影响临床诊断和公共卫生决策。质量控制措施应包括：采用防水耐磨的标签材料；实施双人核对制度（采样者标记、接收者复核）；建立唯一且可追溯的样本编码系统；定期审核电子数据的完整性和一致性。在信息化条件较好的机构，可采用条形码或二维码系统进行样本全流程追踪，减少人工干预环节。

操作者技术差异是质量波动的重要原因。不同医疗机构、甚至同一机构内不同操作者之间的采样技术可能存在显著差异，导致样本质量和检测结果的可比性下降。质量控制体系应包含标准化的操作培训和考核机制，确保所有操作者掌握统一的技术规范。具体措施包括：编制图文并茂的操作手册和视频教程；定期组织理论培训和实操演练；实施"老带新"的导师制度；开展盲法样本交换评估操作者间差异；建立操作技术档案和持续教育记录。区域性质量控制计划也很有价值，通过定期发放标准样本进行实验室间比对，发现并纠正系统性偏差。

受检者因素管理是质量控制的特殊挑战。不同受检者的解剖变异、配合程度、采样时机等因素都可能影响样本质量。质量控制措施应包括：制定详细的受检者准备指南（如禁食水要求）；针对特殊人群（儿童、老人、残疾人等）制定差异化采样方案；记录采样时的特殊情况（如剧烈呕吐、出血等）供检测结果解读参考；对临床高度怀疑但检测阴性的病例建议重复采样或采用不同部位采样。大数据分析技术可帮助识别受检者因素与检测结果间的关联模式，为个性化采样策略提供依据。

持续改进机制是质量控制的目标。通过系统收集和分析质量控制数据，识别薄弱环节，实施针对性干预，并评估改进效果，形成良性循环。具体方法包括：建立多维度的质量指标（如样本合格率、受检者不适率、检测阳性率等）；定期召开质量分析会议；鼓励操作者报告不良事件和近失事件；借鉴其他机构的先进经验；开展质量控制专题研究等。目标是构建全员参与、全程监控、全面改进的质量文化，将质量控制从被动合规转变为主动追求卓越的持续过程。